ang sesuai. Digitoksin mengandung tidak kurang dari
92,0% dan tidak lebih dari 103,0% C41H64O13, dihitung
terhadap zat yang telah dikeringkan. [Catatan Hati-hati,
sangat berbahaya.]
Pemerian Serbuk hablur sangat halus; putih atau kuning
pucat; tidak berbau.
Kelarutan Praktis tidak larut dalam air; agak sukar larut
dalam kloroform; sukar larut dalam etanol, sangat sukar
larut dalam eter.
Baku pembanding Digitoksin BPFI; lakukan
pengeringan dalam hampa udara pada suhu 105º selama 1
jam sebelum dipakai .
Identifikasi
A. Spektrum serapan inframerah zat yang didispersikan
dalam kalium bromida P, menampilkan maksimum hanya
pada bilangan gelombang yang sama seperti pada
Digitoksin BPFI.
B. Lakukan penetapan seperti tertera pada Identifikasi
secara Kromatografi Lapis Tipis <281>.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Digitoksin
BPFI, larutkan dalam metanol P sampai kadar lebih
kurang 1 mg per ml.
Larutan uji Timbang saksama beberapa zat uji,
larutkan dalam metanol P sampai kadar lebih kuran 1 mg
per ml.
tahap gerak Campuran metilen klorida P-metanol P
(93:7).
Penampak bercak Larutan asam sulfat P dalam
metanol P (6 dalam 10)
procedure Totolkan masing-masing 1 μl Larutan uji dan
Larutan baku pada lempeng silika gel P setebal
0,25 mm, biarkan kering. Masukkan lempeng ke dalam
bejana kromatografi berisi tahap gerak, biarkan merambat
lebih kurang tiga per empat tinggi lempeng. Angkat
lempeng, keringkan pada suhu 100º. Semprot lempeng
dengan Penampak bercak, panaskan pada suhu 105º
selama 10 menit dan amati di bawah cahaya ultraviolet
366 nm: harga Rf bercak utama yang diperoleh dari
Larutan uji sesuai dengan yang diperoleh dari larutan (2).
C. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan
uji sesuai dengan kromatogram Larutan baku seperti
tertera pada Penetapan kadar.
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 1,5%;
lakukan pengeringan dalam hampa udara pada suhu 105º
selama 1 jam.
Sisa pemijaran <301> Dapat diabaikan; lakukan
penetapan memakai 100 mg.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
tahap gerak Buat campuran air-asetonitril P (55:45),
saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan penyesuaian
menurut Kesesuaian sistem seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Digitoksin
BPFI, larutkan dan jika perlu encerkan secara bertahap
dengan tahap gerak sampai kadar lebih kurang 40 μg
per ml.
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 50 mg zat,
masukkan ke dalam labu tentukur 200-ml, larutkan dan
encerkan dengan tahap gerak sampai tanda. Pipet 4 ml
larutan ke dalam labu tentukur 25-ml.
Larutan kesesuaian sistem Timbang beberapa
digitoksin dan digoksin, larutkan dan jika perlu encerkan
secara bertahap dengan tahap gerak sampai kadar masing-
masing lebih kurang 40 μg per ml.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 218 nm dan kolom 30 cm x
3,9 mm berisi bahan pengisi L1. Laju alir lebih kurang
1 ml per menit. Lakukan kromatografi terhadap Larutan
baku dan Larutan kesesuaian sistem, rekam kromatogram
dan ukur respons puncak seperti tertera pada procedure :
faktor ikutan tidak lebih dari 2,0; resolusi, R, antara
puncak digoksin dan digitoksin tidak kurang dari 2,0 dan
simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang Larutan
baku tidak lebih dari 2,0%. Waktu retensi relatif digoksin
dan digitoksin masing-masing lebih kurang 0,35 dan 1,0.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 50 μl) Larutan baku dan Larutan uji
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
- 321 -
respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg,
digitoksin, C41H64O13, dengan rumus:
S
U
r
rC25,1
C yaitu kadar Digitoksin BPFI dalam μg per ml Larutan
baku; rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak
Larutan uji dan Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat.
TABLET DIGITOKSIN
Digitoxin Tablet
Tablet Digitoksin mengandung Digitoksin, C41H64O13,
tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari
jumlah yang tertera pada etiket. [Catatan Hindarkan
pemakaian zat pengabsorbsi kuat seperti bentonit dalam
pembuatan tablet digitoksin.]
Baku pembanding Digitoksin BPFI; lakukan
pengeringan dalam hampa udara pada suhu 105º selama
1 jam sebelum dipakai .
Identifikasi
A. Masukkan beberapa serbuk halus tablet setara
dengan tidak kurang dari 1 mg digitoksin ke dalam labu
yang sesuai, tambahkan 20 ml kloroform P, sonikasi.
Saring dan uapkan filtrat di atas tangas uap dengan aliran
udara sampai kering. Larutkan residu dalam 2 ml larutan
yang dibuat dengan mencampurkan 0,3 ml besi(III)
klorida LP dan 50 ml asam asetat glasial P. Tambahkan
melalui dinding 2 ml asam sulfat P: terjadi warna cokelat
pada bidang batas kedua larutan, yang perlahan-lahan
berubah menjadi warna hijau muda, lalu biru, dan
akhirnya seluruh lapisan asam asetat menjadi warna biru.
B. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan
uji sesuai dengan puncak utama kromatogram Larutan
baku seperti tertera pada Penetapan kadar.
Disolusi <1231> [Catatan Selama melakukan penetapan
ini pakailah peralatan kaca yang bersih; terlebih dahulu
dibilas berturut-turut dengan asam klorida P, air, etanol P,
dan keringkan hat-hati. Cegah kontaminasi dari partikel
yang dapat berfluoresensi, permukaan logam dan karet.]
Media disolusi: 500 ml larutan asam klorida P
(3 dalam 500). [Catatan pakailah media disolusi yang
yang sama untuk seluruh pengujian.]
Alat tipe 1: 120±5 rpm.
Waktu: 30 menit; 60 menit.
Larutan baku Timbang saksama lebih kurang 30 mg
Digitoksin BPFI, larutkan dengan sedikit mungkin etanol P
dalam labu tentukur 500-ml, tambahkan etanol encer P
(4 dalam 5) sampai tanda.
Enceran larutan baku Pada saat akan dipakai
encerkan 5,0 ml Larutan baku dengan Media disolusi
sampai 500,0 ml. Masukkan 2,0-10,0 ml larutan ini secara
terpisah ke dalam corong pisah untuk memperoleh
Enceran larutan baku yang setara dengan 20%; 40%;
60%; 80% dan 100% digitoksin dari jumlah yang tertera
pada etiket per 500 ml. Tambahkan Media disolusi
sampai 10 ml, dan lakukan seperti tertera pada procedure ,
mulai dari “Ekstraksi tiga kali, tiap kali dengan 15 ml
kloroform P”.
procedure Lakukan seperti tertera pada Uji Disolusi
<1231>. Tepat sesudah 30 menit, ambil alikuot pada
bagian tengah antara batang pengaduk dan dinding
bejana, dan lebih kurang pada pertengahan kedalaman
labu disolusi. Saring larutan dengan cepat memakai
penyaring membran dengan porositas tidak lebih dari
0,8 μm, buang 10 ml filtrat pertama. Tanpa mengganti
Media disolusi, teruskan rotasi keranjang, tepat sesudah
30 menit lakukan pengamblan alikuot yang lain dengan
cara yang sama. Lakukan pada masing-masing larutan
ini sebagai berikut: Asumsikan terlarut 100%
digitoksin dari jumlah yang tertera pada etiket, pindahkan
alikuot setara dengan 6 μg digitoksin ke dalam corong
pisah yang sesuai. Ekstraksi tiga kali, tiap kali dengan
15 ml kloroform P. Kumpulkan ekstrak kloroform dalam
labu bersumbat kaca. Uapkan kumpulan ekstrak di atas
tangas uap, dengan bantuan aliran udara, sampai kering.
Dengan cara yang sama, lakukan percobaan blangko
memakai beberapa volume Media disolusi yang
sesuai.
Pengukuran fluoresensi Buat Larutan baku, atur
semua labu dalam satu rangkaian secara urut, sampai
waktu yang dipakai dari penambahan pereaksi sampai
pembacaan fluoresensi sama untuk setiap percobaan.
Perlakukan setiap labu pada waktu yang sama sebagai
berikut: tambahkan 10 ml larutan segar dengan
melarutkan 35 mg asam askorbat P dalam 25 ml metanol
P dan secara hati-hati tambahkan 100 ml asam klorida P.
Campur, tambahkan 1 ml larutan segar dengan
mengencerkan 1 ml hidrogen peroksida P 30% dengan
air sampai 500 ml, dan encerkan 1 bagian volume larutan
yang diperoleh dengan 20 bagian volume air; campur dan
tutup labu. sesudah 45 menit, ukur fluoresensi pada lebih
kurang 575 nm, dan pada panjang gelombang eksitasi
lebih kurang 395 nm. Koreksi tiap pembacaan dengan
blangko dan gambarkan kurva baku fluoresensi terhadap
persentase disolusi. Dengan perhitungan dari kurva baku,
tentukan persentase disolusi digitoksin tiap tablet dalam
30 menit dan persentase disolusi jumlah digitoksin dalam
60 menit, dengan memperhatikan jumlah volume alikuot
yang dipindahkan sesudah 30 menit pertama.
Toleransi Dalam waktu 30 menit, harus larut tidak
kurang dari 60% C41H64O13, dari jumlah yang tertera pada
etiket, untuk tiap tablet yang diuji, dan dalam waktu
60 menit, harus larut tidak kurang dari 85% dari jumlah
yang tertera pada etiket, untuk rata-rata tablet yang diuji.
Keseragaman sediaan <911> Memenuhi syarat.
- 322 -
procedure penetapan keseragaman kandungan
Masukkan satu tablet ke dalam labu Erlemeyer bersumbat
kaca yang sesuai. Tambahkan beberapa volume tahap
gerak yang diukur saksama, seperti tertera pada
Penetapan kadar dalam Digitoksin, sampai diperoleh
larutan dengan kadar lebih kurang 10 μg per ml; kocok
memakai alat mekanik sampai tablet hancur
sempurna (tidak kurang dari 30 menit). Sentrifus dan
pakailah beningan sebagai larutan uji. Timbang saksama
beberapa Digitoksin BPFI, larutkan dalam tahap gerak,
encerkan secara bertahap dan kuantitatif dengan tahap
gerak sampai diperoleh larutan baku dengan kadar lebih
kurang 10 μg per ml. Lakukan seperti tertera pada
Penetapan kadar. Hitung jumlah dalam mg, digitoksin,
C41H64O14 dalam tablet yang dipakai dengan rumus:
S
U
r
r
D
LC
L yaitu jumlah digitoksin dalam mg yang tertera pada
etiket; C yaitu kadar Digitoksin BPFI dalam μg per ml
larutan baku; D yaitu kadar digitoksin dalam μg per ml
larutan uji berdasarkan jumlah yang tertera pada etiket
dan faktor pengenceran; rU dan rS berturut-turut yaitu
respons puncak digitoksin dari Larutan uji dan Larutan
baku.
Penetapan kadar
tahap gerak, Larutan baku, Larutan kesesuaian sistem,
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Penetapan kadar dalam Digitoksin.
Larutan uji Timbang dan serbukkan tidak kurang dari
20 tablet. Timbang saksama serbuk tablet yang setara
dengan lebih kurang 1 mg digitoksin, masukkan ke dalam
labu tentukur 25-ml. Tambahkan 15 ml tahap gerak, dan
sonikasi. Encerkan dengan tahap gerak sampai tanda.
Saring, buang beberapa ml filtrat pertama.
procedure Lakukan seperti tertera pada Penetapan
kadar dalam Digitoksin. Hitung jumlah dalam μg,
digitoksin, C41H64O13, dalam serbuk tablet yang
dipakai dengan rumus:
S
U
r
rC25
C yaitu kadar Digitoksin BPFI dalam μg per ml Larutan
baku; rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak dari
Larutan uji dan Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup baik.
DIGOKSIN
Digoxin
O O
O
CH3
O
OH
HCH3
H
O
OHOH
CH3
H
HH
3
OH
3 -[(O-2,6-Dideoksi- -D-ribo-heksopirannosil-(1 4)-
O-2,6-dideoksi- -D-ribo-heksopiranosil)-(1 4)-2,6-
Dideoksi- -D-ribo-heksopiranosil)oksi]-12 ,14-
dihidroksi-5 -kard-20(22)-enolida [20830-75-5]
C41H64O14 BM 780,95
Digoksin yaitu glikosida kardiotonik yang diperoleh
dari daun Digitalis lanata Ehrhart (Familia
Scrophulariaceae). Mengandung tidak kurang dari 95,0%
dan tidak lebih dari 101,0% C41H64O14 dihitung terhadap
zat yang telah dikeringkan. [Perhatian hati-hati, sangat
beracun.]
Pemerian Hablur, jernih sampai putih atau serbuk
hablur; putih; tidak berbau.
Kelarutan Praktis tidak larut dalam air dan dalam eter;
mudah larut dalam piridin; sukar larut dalam etanol encer
dan dalam kloroform.
Baku pembanding Digoksin BPFI; [Perhatian
Kardiotonik beracun.] lakukan pengeringan pada tekanan
tidak lebih dari 5 mmHg pada suhu 105º selama 1 jam
sebelum dipakai . Gitoksin BPFI; [Perhatian Hindari
kontak.]; tidak boleh dikeringkan sebelum dipakai .
Simpan dalam wadah tertutup rapat dan terlindung dari
cahaya.
Identifikasi
A. Spektrum serapan inframerah zat yang didispersikan
dalam kalium bromida P, menampilkan maksimum hanya
pada panjang gelombang yang sama seperti pada
Digoksin BP FI.
B. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan
uji sesuai dengan Larutan baku seperti tertera pada
Penetapan kadar.
C. Harga Rf bercak utama warna biru yang diperoleh
dari Larutan uji sesuai dengan yang diperoleh dari
Larutan baku pada uji Glikosida sejenis, yang ditetapkan
secara kromatografi lapis tipis.
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 1,0%;
lakukan pengeringan pada tekanan tidak lebih dari
5 mmHg pada suhu 105º selama 1 jam.
- 323 -
Sisa pemijaran <301> Tidak lebih dari 0,5%; lakukan
penetapan memakai 100 mg zat.
Glikosida sejenis Tidak lebih dari 3%, dihitung sebagai
gitoksin.
Penampak bercak Campur 10 ml larutan kloramina T P
(3 dalam 100) yang dibuat segar dan 40 ml larutan asam
trikloroasetat P dalam etanol mutlak P (1 dalam 4).
Pelarut Campuran kloroform P-metanol P (2:1).
Larutan baku Timbang saksama beberapa Digoksin
BPFI, larutkan dalam Pelarut sampai kadar 10 mg per ml.
Larutan baku gitoksin Timbang saksama beberapa
Gitoksin BPFI, larutkan dalam Pelarut sampai kadar
0,30 mg per ml.
Larutan uji Timbang 250,0 mg zat, masukkan ke dalam
labu tentukur 25-ml, larutkan dalam Pelarut, encerkan
dengan pelarut yang sama sampai tanda.
procedure Lakukan Kromatografi lapis tipis tahap balik
seperti tertera pada Kromatografi <931>. Totolkan secara
terpisah masing-masing 10 μl Larutan uji, Larutan baku
dan Larutan baku gitoksin pada lempeng kromatografi
silika gel P setebal 0,25 mm yang terikat secara permanen
dengan oktadesilsilana P (C18). Masukkan lempeng ke
dalam bejana kromatografi berisi tahap gerak metanol P-
air (7:3), biarkan merambat sampai 15 cm di atas garis
penotolan. Angkat lempeng, biarkan kering di udara,
semprot lempeng dengan Penampak bercak yang dibuat
segar; panaskan pada suhu 110º selama 10 menit. Amati
di bawah cahaya ultraviolet 366 nm: tidak ada bercak
pada kromatogram Larutan uji, kecuali bercak digoksin
yang lebih intensif dari bercak Larutan baku gitoksin.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
tahap gerak Buat campuran air-asetonitril P (37:13),
saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan penyesuaian
menurut Kesesuaian sistem seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Digoksin
BPFI, larutkan dalam etanol encer P, encerkan secara
bertahap sampai kadar lebih kurang 250 μg per ml.
Sonikasikan agar larut.
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 50 mg zat,
masukkan ke dalam labu tentukur 200-ml. Larutkan
dalam lebih kurang 150 ml etanol encer P, sonikasikan
dan encerkan dengan pelarut yang sama sampai tanda.
Larutan kesesuaian sistem Timbang saksama beberapa
Digoksin BPFI dan digoksigenin bisdigitoksida, larutkan
dalam etanol encer P sampai kadar masing-masing lebih
kurang 40 μg per ml.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 218 nm dan kolom 25 cm x
4,2 mm berisi bahan pengisi L1. Laju alir lebih kurang
3,0 ml per menit. Lakukan kromatografi terhadap Larutan
kesesuaian sistem, rekam kromatogram dan ukur respons
puncak seperti tertera pada procedure : simpangan baku
relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%,
faktor ikutan puncak digoksin tidak lebih dari 2,0 dan
resolusi, R, antara puncak digoksin dan digoksigenin
bisdigitoksosida tidak kurang dari 2,0.
procedure Suntikan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 10 μl) Larutan baku dan Larutan uji
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg,
digoksin, C41H64O14, dalam zat yang dipakai dengan
rumus:
S
U
r
rC2,0
C yaitu kadar Digoksin BPFI dalam μg per ml Larutan
baku; rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak
Larutan baku dan Larutan uji.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat.
TABLET DIGOKSIN
Digoxin Tablet
Tablet Digoksin mengandung Digoksin, C41H64O14, tidak
kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari
jumlah yang tertera pada etiket.
Baku pembanding Digoksin BPFI; [Perhatian
Kardiotonik beracun.]; lakukan pengeringan dalam
hampa udara pada suhu 105º selama 1 jam sebelum
dipakai . Simpan dalam wadah tertutup rapat.
Identifikasi
A. Penampak bercak Campur 10 ml larutan kloramina
T P (3 dalam 100) yang dibuat segar dan 40 ml larutan
asam trikloroasetat P dalam etanol mutlak P
(1 dalam 4).
Pelarut Etanol mutlak P.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Digoksin
BPFI, larutkan dalam Pelarut sampai kadar lebih kurang
0,25 mg per ml.
Larutan uji Timbang saksama beberapa serbuk tablet,
setara dengan lebih kurang 0,5 mg digoksin, masukkan ke
dalam tabung sentrifuga 10 ml. Tambahkan 2 ml Pelarut,
sonikasi selama 10 - 15 menit, dan sentrifus, pakailah
beningan.
procedure Lakukan seperti tertera pada uji Glikosida
sejenis dalam Digoksin, kecuali abaikan pemakaian
Larutan baku Gitoksin. Amati lempeng di bawah cahaya
ultraviolet 366 nm: harga Rf bercak utama Larutan uji
sesuai dengan Larutan baku.
B. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan
uji sesuai dengan Larutan baku seperti diperoleh pada
Penetapan kadar.
Disolusi <1231> [Catatan Lakukan procedure dengan
memakai peralatan kaca bersih yang terlebih dahulu
dibilas berturut-turut dengan asam klorida P, air, etanol P
dan keringkan hati-hati. Hindari kontaminasi dari
- 324 -
partikel yang dapat berfluoresensi, dan dari permukaan
logam dan karet.]
Media disolusi:500 ml asam klorida 0,1 N [Catatan
pakailah media disolusi yang sama untuk semua
pengujian.]
Alat tipe 1: 120 rpm.
Waktu: 60 menit.
Larutan asam askorbat-metanol Buat larutan asam
askorbat P dalam metanol P sampai kadar 2 mg per ml.
Larutan hidrogen peroksida-metanol Encerkan 2,0 ml
hidrogen peroksida P 30% yang baru ditetapkan
kadarnya dengan metanol P sampai 100 ml. Simpan
dalam lemari pendingin. Pada waktu akan dipakai ,
encerkan 2,0 ml larutan ini dengan metanol P sampai
100 ml.
Larutan baku Timbang saksama lebih kurang 25 mg
Digoksin BPFI, larutkan dengan sedikit mungkin etanol P
dalam labu tentukur 500-ml, tambahkan larutan etanol
encer P (4 dalam 5) sampai tanda. Encerkan 10,0 ml
larutan ini dengan larutan etanol encer P (4 dalam 5)
sampai 100,0 ml, campur. Pada waktu akan dipakai ,
encerkan berturut-turut beberapa alikuot dengan Media
disolusi sampai 50,0 ml untuk memperolah Larutan baku
setara dengan masing-masing 20%, 40%, 60%, 80% dan
100% digoksin dari jumlah yang tertera pada etiket per
500 ml.
Larutan uji Saring segera beberapa alikuot
memakai penyaring membran dengan porositas tidak
lebih dari 0,8 μm, buang 10 ml filtrat pertama. pakailah
filtrat selanjutnya sebagai Larutan uji.
procedure Masukkan masing-masing secara terpisah ke
dalam dua labu bersumbat kaca beberapa volume sama
(1,0 ml) Larutan uji, Larutan baku dan Media disolusi
sebagai blangko. Dimulai dari Larutan baku, tempatkan
semua labu dalam urutan yang sama selama percobaan
sedemikian rupa, sesampai waktu yang dipakai dari
penambahan pereaksi sampai pembacaan fluoresensi
sama untuk tiap labu dalam satu rangkaian. Lakukan
penambahan pada saat yang sama ketiga pereaksi berikut,
secepatnya, goyang sesudah setiap penambahan: 1,0 ml
Larutan asam askorbat-metanol; 5,0 ml asam klorida P
dan 1,0 ml Larutan hidrogen peroksida-metanol. Tutup
labu, ukur fluoresensi sesudah 2 jam pada lebih kurang
485 nm dan panjang gelombang eksitasi lebih kurang
372 nm. Untuk uji kestabilan fluorometer, ulangi
pengukuran fluoresensi pada satu atau lebih Larutan baku
yang dipakai . Koreksi pembacaan terhadap blangko
dan gambar kurva fluoresensi baku terhadap persentase
disolusi. Tetapkan persentase disolusi digoksin dalam
Larutan uji dari pembacaan kurva baku.
Toleransi Dalam waktu 60 menit harus larut tidak
kurang dari 80% (Q) C41H64O14, dari jumlah yang tertera
pada etiket. Persyaratan dipenuhi jika jumlah yang
terlarut memenuhi Tabel Penerimaan di bawah ini:
Tabel Penerimaan
Tahap l Jumlah
yang diuji Kriteria penerimaan
L1
6
Masing-masing tidak kurang
dari Q + 5%
L2 6 Rata-rata dari 12 tablet (L1 +
L2) sama atau lebih dari
Q,dan tidak ada tablet yang
kurang dari Q – 5%.
Keseragaman sediaan <911> Memenuhi syarat.
Penetapan kadar
tahap gerak, Sistem kromatografi dan Larutan
kesesuaian sistem Lakukan seperti tertera pada Penetapan
kadar dalam Digoksin.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Digoksin
BPFI, larutkan dalam etanol encer P, encerkan secara
bertahap dengan pelarut sama sampai kadar lebih kurang
40 pg per ml. Sonikasi sampai larut.
Larutan uji Timbang dan serbukkan tidak kurang dari
20 tablet. Timbang saksama beberapa serbuk tablet setara
dengan lebih kurang 1 mg digoksin, masukkan ke dalam
labu erlemeyer bersumbat kaca 50 ml. Tambahkan
25,0 ml etanol encer P sambil di goyang, sonikasi selama
30 menit, dinginkan. Saring beberapa larutan ini melalui
penyaring membran dengan porositas 0,8 μm, buang
10 ml filtrat pertama.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 50 μl) Larutan baku dan Larutan uji
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg,
digoksin, C41H64O14, dalam serbuk tablet yang dipakai
dengan rumus:
S
U
r
rC25
C yaitu kadar Digoksin BPFI dalam mg per ml Larutan
baku; rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak
digoksin dari Larutan uji dan Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat.
DIHIDROERGOTAMIN MESILAT
Dihydroergotamin Mesylate
HN
N
CONH
N
O
N
H
H
OH
CH2
CH3
H
H
O O
H
CH3 . CH3SO3H
Dihidroergotamin monometanasulfonat [6190-39-2]
C33H37N5O5.CH4O3S BM 679,79
- 325 -
Dihidroergotamin Mesilat mengandung tidak kurang dari
97,0% dan tidak lebih dari 103,0% C33H37N5O5.CH4O3S
dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan.
Pemerian Serbuk; putih agak kekuningan atau hampir
putih sampai agak kemerahan; berbau lemah.
Kelarutan Larut dalam etanol; sukar larut dalam air dan
dalam kloroform.
Baku pembanding Dihidroergotamin Mesilat BPFI;
lakukan pengeringan dalam hampa udara pada suhu 100º
sampai bobot tetap, sebelum dipakai . Simpan dalam
wadah tertutup rapat, terlindung dari cahaya.
Identifikasi
A. Spektrum serapan inframerah zat yang telah
dikeringkan dan didispersikan dalam kalium bromida P
menampilkan maksimum pada bilangan gelombang yang
sama seperti pada Dihidroergotamin Mesilat BPFI.
B. Spektrum serapan ultraviolet larutan (1 dalam
20.000) dalam etanol P 70% menampilkan maksimum
dan minimum pada panjang gelombang yang sama seperti
pada Dihidroergotamin Mesilat BPFI dan daya serap
masing-masing, dihitung terhadap zat yang telah
dikeringkan pada panjang gelombang serapan maksimum,
lebih kurang 280 nm, berbeda tidak lebih dari 3,0%.
C. Harga Rf bercak utama dari Larutan uji dalam uji
Alkaloid sejenis sesuai dengan harga Rf bercak utama
Larutan baku.
Rotasi jenis <1081> Antara -16,7º dan -22,7º, dihitung
terhadap zat yang telah dikeringkan; lakukan penetapan
dalam campuran pelarut kloroform P-etanol P-amonium
hidroksida P (10:10:1), sampai kadar 25 mg per 1 ml.
pH <1071> Antara 4,4 dan 5,4; lakukan penetapan
memakai larutan (1 dalam 1000).
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 4,0%
lakukan pengeringan dalam hampa udara pada suhu 100º
sampai bobot tetap.
Alkaloid sejenis Jumlah cemaran tidak lebih dari 2,0%.
Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi lapis tipis
seperti tertera pada Kromatografi <931>.
tahap gerak Buat campuran kloroform P-etanol P
(9:1).
Penampak bercak Larutkan 800 mg
p-dimetilaminobenzaldehida P dalam campuran dingin 80
g etanol P dan 20 g asam sulfat P.
Pelarut Buat campuran kloroform P-metanol
P-amonium hidroksida P (10:10:1).
Larutan uji Timbang beberapa zat, larutkan dalam
Pelarut, sampai kadar 20 mg per ml.
Larutan baku Timbang beberapa Dihidroergotamin
Mesilat BPFI, larutkan dalam Pelarut, sampai kadar
20 mg per ml.
Enceran larutan baku Buat satu seri pengenceran
Larutan baku dalam Pelarut sampai kadar 0,40 mg,
0,20 mg, dan 0,10 mg per ml.
procedure Totolkan secara terpisah masing-masing
5 μl Larutan uji, Larutan baku dan Enceran larutan baku
pada lempeng kromatografi silika gel P. Masukkan
lempeng ke dalam bejana kromatografi yang telah
dijenuhkan dengan tahap gerak selama 30 menit. Biarkan
merambat sampai lebih kurang tiga per empat tinggi
lempeng. Angkat lempeng, biarkan kering di udara,
semprot lempeng dengan Penampak bercak. Harga Rf
bercak utama Larutan uji sesuai dengan harga Rf Larutan
baku. Perkirakan kadar bercak lain dari Larutan uji,
dengan membandingkan terhadap bercak Enceran larutan
baku. Bercak yang diperoleh dari larutan 0,40 mg;
0,20 mg, dan 0,10 mg per ml pengenceran setara dengan
berturut-turut 2,0%; 1,0% dan 0,5% cemaran.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
Pengencer 1 Buat larutan 0,1 ml asam fosfat P dalam
1000 ml air.
Pengencer 2 Buat campuran Pengencer 1- asetonitril P
(60:40).
Larutan A Buat campuran air- air amonia P 25%-asam
format P 98% (1000:10:5), saring dan awaudarakan. Atur
pH sampai 8,5.
Larutan B Buat campuran asetonitril P-Larutan A
(80:20), saring dan awaudarakan.
tahap gerak Buat variasi campuran Larutan A dan
LarutanB seperti tertera pada Sistem kromatografi. Jika
perlu lakukan penyesuaian menurut Kesesuaian sistem
seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Larutan baku Timbang saksama beberapa
Dihidroergotamin Mesilat BPFI, larutkan dengan
asetonitril P dan encerkan dengan Pengencer 1 secara
kuantitatif dan jika perlu bertahap sampai kadar lebih
kurang 0,6 mg per ml. [Catatan Perbandingan akhir
asetonitril P dan Pengencer 1 harus sama dengan
perbandingan akhir dalam Larutan uji.]
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 30 mg zat,
masukkan ke dalam labu tentukur 50-ml, larutkan dengan
20 ml asetonitril P, encerkan dengan Pengencer 1 sampai
tanda.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 280 nm dan kolom 25 cm x
4,0 mm berisi bahan pengisi L1. Laju alir lebih kurang
1,5 ml per menit. Kromatograf diprogram sebagai berikut:
Waktu
(menit)
Larutan
A (%)
Larutan
B (%) Eluasi
0 60 40 Kesetimbangan
0-12 60 50 40 50 Gradien linier
12-20 50 15 50 85 Gradien linier
20-25 15 85 Isokratik
24-25 15 60 85 40 Gradien linier
25-31 60 40 Kesetimbangan
- 326 -
Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku, rekam
kromatogram dan ukur respons puncak seperti tertera
pada procedure : faktor ikutan antara 0,8 dan 1,5;
simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang tidak
lebih dari 2,0%.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 10 l) Larutan baku dan Larutan uji
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg,
dihidroergotamin mesilat, C33H37N5O5.CH4O3S, dalam zat
yang dipakai dengan rumus:
S
U
r
rC50
C yaitu kadar Dihidroergotamin Mesilat BPFI dalam
mg per ml Larutan baku; rU dan rS berturut-turut yaitu
respons puncak dari Larutan uji dan Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup baik,
tidak tembus cahaya.
DIHIDROSTREPTOMISIN SULFAT
Dihydrostreptomycin Sulphate
Dihidrostreptomisin sulfat (2:3) (garam) [5490-27-7]
(C21H41N7O12)2.3H2SO4 BM 1461,44
Dihidrostreptomisin Sulfat memiliki potensi setara
dengan tidak kurang dari 650 μg Dihidrostreptomisin,
C21H41N7O12, per mg. Jika pada etiket dinyatakan sebagai
hablur, potensinya setara dengan tidak kurang dari 725 μg
dihidrostreptomisin per mg, atau jika pada etiket
dinyatakan hanya untuk pemakaian oral, potensinya
setara dengan tidak kurang dari 450 μg
dihidrostreptomisin per mg.
Pemerian Serbuk hablur atau amorf; putih atau hampir
putih. Bentuk amorf bersifat higroskopis.
Kelarutan Mudah larut dalam air; praktis tidak larut
dalam aseton, dalam kloroform dan dalam metanol.
Baku pembanding Dihidrostreptomisin Sulfat BPFI;
lakukan pengeringan pada tekanan tidak lebih dari
5 mmHg pada suhu 100º selama 4 jam sebelum
dipakai . Simpan dalam wadah tertutup rapat,
terlindung dari cahaya, di tempat sejuk. Streptomisin
Sulfat BPFI; lakukan pengeringan pada tekanan tidak
lebih dari 5 mmHg pada suhu 60º selama 3 jam sebelum
dipakai . Simpan dalam wadah tertutup rapat,
terlindung dari cahaya, di tempat sejuk. Endotoksin BPFI;
[Catatan Bersifat pirogenik, penanganan vial dan isi
harus hati-hati untuk menghindari kontaminasi.]
Rekonstitusi semua isi, pakailah larutan dalam waktu
14 hari. Simpan vial yang belum dibuka dan larutan,
dalam lemari pendingin.
Identifikasi
A. Pada larutan 4 mg zat dalam 2 ml air, tambahkan
0,5 ml asam klorida 1 N, panaskan dalam tangas air
selama 20 menit. Angkat tabung dari tangas, tambahkan
1,0 ml larutan 1-naftol P dalam natrium hidroksida 1 N
(1 dalam 200). Panaskan lagi selama 10 menit, dinginkan
sebentar dalam tangas es dan tambahkan air sampai
25 ml: terjadi warna merah yang terlihat jelas selama
lebih kurang 10 menit.
B. Larutan (1 dalam 50) menampilkan reaksi Sulfat
cara A, B, dan C seperti tertera pada Uji Identifikasi
Umum <291>.
Sifat hablur <1091> Memenuhi syarat; lakukan
pengujian bila pada etiket dinyatakan sebagai hablur.
pH <1071> Antara 4,5 dan 7,0; lakukan penetapan
memakai larutan yang mengandung 200 mg per ml;
kecuali jika pada etiket dinyatakan untuk pemakaian
oral, maka pH yaitu antara 3,0 dan 7,0.
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 5,0%;
lakukan pengeringan dalam botol bersumbat kapiler
dalam hampa udara pada suhu 60° selama 3 jam
memakai lebih kurang 100 mg zat; susut
pengeringan tidak lebih dari 14,0%, jika pada etiket
dinyatakan untuk pemakaian oral.
Streptomisin Tidak lebih dari 3,0%; tidak lebih dari
1,0% jika pada etiket dinyatakan sebagai hablur; tidak
lebih dari 5,0% jika pada etiket dinyatakan hanya untuk
pemakaian oral.
Larutan persediaan besi(III) klorida Larutkan 5 g
besi(III) klorida P dalam 50 ml asam klorida 0,1 N.
Larutan besi(III) klorida Encerkan 2,5 ml Larutan
persediaan besi(III) klorida dengan asam klorida 0,01 N
sampai 100 ml. pakailah larutan ini pada hari pembuatan.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Streptomisin
Sulfat BPFI, larutkan dalam air sampai diperoleh larutan
persediaan yang mengandung 1,0 mg streptomisin
C21H39N7O12 per ml. Pipet masing-masing 1 ml; 2 ml;
3 ml; 4 ml; dan 5 ml larutan ini ke dalam lima labu
tentukur 25-ml, tambahkan berturut-turut 9,0 ml; 8,0 ml;
7,0 ml; 6,0 ml; dan 5,0 ml air ke dalam labu secara
berurutan.
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 800 mg zat,
masukkan ke dalam labu tentukur 25-ml, larutkan dan
O
O
NHCNH2
OH
HO
OH
H2NCN
R'
OH
R
R'HO
OH
RNH
O
O
H
NH
NH
. 3H2SO4R R'
CH3
R
CH2OH
2
- 327 -
encerkan dengan air sampai tanda. Pipet 10 ml larutan ini
ke dalam labu tentukur 25-ml.
procedure Pada masing-masing labu yang berisi
Larutan baku, Larutan uji, dan pada labu tentukur 25-ml
ke 7 yang berisi 10,0 ml air sebagai blangko, tambahkan
2,0 ml natrium hidroksida 1 N, panaskan dalam tangas air
selama 10 menit. Dinginkan labu tentukur dalam air es
selama 3 menit, dan tambahkan pada masing-masing labu
2,0 ml asam klorida 1,2 N dan 5,0 ml larutan besi(III)
klorida P. Encerkan dengan air sampai tanda. Ukur
serapan Larutan uji dan Larutan baku pada bilangan
gelombang serapan maksimum lebih kurang 550 nm
terhadap larutan blangko. Buat kurva antara serapan dan
kadar streptomisin dalam μg per ml dari kelima larutan
yang diperoleh dari Larutan baku. Dari kurva yang
diperoleh, tetapkan kadar streptomisin, C, dalam μg per
ml Larutan uji. Hitung persentase streptomisin dengan
rumus:
WP
C6250
W yaitu bobot zat dalam mg dan P yaitu potensi,
dalam μg dihidrostreptomisin per mg zat seperti tertera
pada Penetapan kadar.
Syarat lain Jika pada etiket tertera dihidrostreptomisin
sulfat steril, memenuhi syarat uji Sterilitas <71> dan
Endotoksin Bakteri <201> seperti tertera pada
Dihidrostreptomisin Injeksi. Jika pada etiket tertera
dihidrostreptomisin sulfat harus diproses lebih lanjut
untuk pembuatan sediaan injeksi, memenuhi syarat uji
Endotoksin Bakteri <201> seperti tertera pada
Dihidrostreptomisin Injeksi.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
turbidimetri seperti tertera pada Penetapan Potensi
Antibiotik secara Mikrobiologi <131>.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat.
DIKLOFENAK KALIUM
Diclofenac Potassium
Cl
H
N
OKCl
O
Kalium [o-(2,6-dikloroanilino)fenil]asetat [15307-81-0]
C14H10Cl2KNO2 BM 334,24
Diklofenak Kalium mengandung tidak kurang dari 99,0%
dan tidak lebih dari 101,0% C14H10Cl2KNO2, dihitung
terhadap zat yang telah dikeringkan.
Baku pembanding Diklofenak Kalium BPFI. Senyawa
Sejenis A Diklofenak BPFI [N-(2,6-diklorofenil) indolin-
2-on] (C14H9Cl2NO4 BM 278,14); tidak boleh
dikeringkan. Simpan dalam wadah tertutup rapat dan
terlindung cahaya.
Identifikasi
A. Spektrum serapan inframerah zat yang telah
dikeringkan dan didispersikan dalam kalium bromida P,
menampilkan maksimum hanya pada bilangan
gelombang yang sama seperti pada Diklofenak Kalium
BPFI.
B. Spektrum serapan ultraviolet larutan dalam
metanol P (0,1 mg dalam 1 ml) menampilkan maksimum
dan minimum pada panjang gelombang yang sama seperti
pada Diklofenak Kalium BPFI.
C. menampilkan reaksi Kalium cara A seperti tertera
pada Uji Identifikasi Umum <291>
pH <791> Antara 7,0 dan 8,5; lakukan penetapan
memakai larutan 1% dalam air.
Logam berat <371> Metode III Tidak lebih dari 10 bpj.
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 0,5%;
lakukan pengeringan dalam hampa udara pada suhu 105°
selama 3 jam.
Senyawa sejenis Senyawa sejenis A diklofenak tidak
lebih dari 0,1%; masing-masing cemaran lain tidak lebih
dari 0,1% dan jumlah semua cemaran tidak lebih dari
0,3%. Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair
kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Pengencer Buat campuran air-metanol P (30:70).
Dapar fosfat pH 2,5 Buat campuran beberapa volume
sama asam fosfat 0,01 M dan Larutan natrium fosfat
monobasa 0,01 M. Atur pH sampai 2,5±0,2 dengan
penambahan salah satu komponen yang sesuai.
tahap gerak Buat campuran metanol P-Dapar fosfat pH
2,5 (70:30), saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan
penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera
pada Kromatografi <931>.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Senyawa
Sejenis A Diklofenak BPFI larutkan dan encerkan dengan
metanol P sampai kadar lebih kurang 0,25 mg per ml.
Encerkan larutan dengan Pengencer secara kuantitatif
sampai kadar lebih kurang 1,5 g per ml .
Larutan resolusi Timbang beberapa dietil ftalat,
Diklofenak Kalium BPFI dan Senyawa Sejenis A
Diklofenak BPFI, larutkan dan encerkan dengan
Pengencer sampai kadar berturut-turut lebih kurang
40 g per ml, 0,5 mg per ml dan 22,5 g per ml.
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 50 mg zat,
masukkan ke dalam labu tentukur 100-ml. Larutkan dan
encerkan dengan Pengencer sampai tanda.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 254 nm dan kolom 25 cm x
- 328 -
4,6 mm berisi bahan pengisi L7. Laju alir lebih kurang
1 ml per menit. Lakukan kromatografi terhadap Larutan
resolusi, rekam kromatogram dan ukur respons puncak
seperti tertera pada procedure : waktu retensi relatif dietil
ftalat, senyawa sejenis A diklofenak dan diklofenak
kalium berturut-turut yaitu lebih kurang 0,5; 0,7; dan
1,0; resolusi, R, antara puncak dietil ftalat dan senyawa
sejenis A diklofenak tidak kurang dari 4,0. Lakukan
kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram
dan ukur respons puncak seperti tertera pada procedure :
simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang tidak
lebih dari 5,0%.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 30 l) Larutan baku dan Larutan uji,
rekam kromatogram dan ukur respons puncak. Hitung
persentase senyawa sejenis A diklofenak dalam zat
dengan rumus:
S
U
r
r
W
C10
C yaitu kadar Senyawa Sejenis A Diklofenak BPFI
dalam g per ml Larutan baku, W yaitu bobot zat dalam
mg yang dipakai dalam Larutan uji; rU dan rS berturut-
turut yaitu respons puncak senyawa sejenis A
diklofenak kalium dari Larutan uji dan Larutan baku.
Hitung persentase masing-masing cemaran lain dalam zat
dengan rumus:
S
i
r
r
W
C10
ri yaitu respons puncak masing-masing cemaran lain
yang diperoleh dari Larutan uji.
Penetapan kadar Timbang saksama lebih kurang
300 mg zat, larutkan dalam 50 ml asam asetat glasial P.
Titrasi dengan asam perklorat 0,1 N LV, tetapkan titik
akhir secara potensiometri. Lakukan penetapan blangko.
Tiap ml asam perklorat 0,1 N
setara dengan 33,424 mg C14H10Cl2KNO2
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah terlindung dari
cahaya pada suhu ruang terkendali.
TABLET DIKLOFENAK KALIUM
Diclofenac Potassium Tablet
Tablet Diklofenak Kalium mengandung Diklofenak
Kalium, C14H10Cl2KNO2, tidak kurang dari 90,0% dan
tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada
etiket.
Baku pembanding Diklofenak Kalium BPFI; Senyawa
Sejenis A Diklofenak BPFI [N-(2,6-diklorofenil) indolin-
2-on] (C14H9Cl2NO4 BM 278,14); tidak boleh
dikeringkan. Simpan dalam wadah tertutup rapat dan
terlindung cahaya.
Identifikasi
A. Waktu retensi puncak utama kromatogram Larutan
uji sesuai dengan Larutan baku seperti diperoleh pada
Penetapan kadar.
B. menampilkan reaksi Kalium cara A seperti tertera
pada Uji Identifikasi Umum <291>.
Disolusi <1231>
Media disolusi: 900 ml cairan usus buatan P (tanpa
enzim)
Alat tipe 2: 50 rpm
Waktu: 60 menit
procedure Lakukan penetapan jumlah C14H10Cl2KNO2
yang terlarut dengan mengukur serapan alikuot yang telah
disaring melalui penyaring membran dengan porositas
0,45 μm, jika perlu diencerkan dengan Media disolusi dan
serapan larutan baku Diklofenak Kalium BPFI dalam
media yang sama pada panjang gelombang serapan
maksimum lebih kurang 276 nm. Hitung persentase
diklofenak kalium terlarut dengan rumus:
100900
S
US
A
A
L
C
CS yaitu kadar Diklofenak Kalium BPFI dalam mg per
ml Larutan baku; L yaitu jumlah dalam mg diklofenak
kalium yang tertera pada etiket; AU dan AS berturut-turut
yaitu serapan Larutan uji dan Larutan baku; 900 yaitu
volume Media disolusi dalam ml; 100 yaitu faktor
konversi terhadap persen.
Toleransi Dalam waktu 60 menit harus larut tidak
kurang dari 80% (Q) C14H10Cl2KNO2, dari jumlah yang
tertera pada etiket.
Keseragaman sediaan <911> Memenuhi syarat.
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 5,0%;
lakukan penetapan pada suhu 105°±2° selama 3 jam.
Kalium Tidak kurang dari 2,40% dan tidak lebih dari
2,94%; tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari
110,0% dihitung terhadap jumlah teoritis kalium.
Baku Timbang saksama lebih kurang 50 mg kalium
klorida P, masukkan ke dalam krus leburan kuarsa.
Zat uji Timbang saksama beberapa tidak kurang dari
5 tablet (untuk tablet yang mengandung 50 mg diklofenak
kalium), masukkan ke dalam krus leburan kuarsa.
Blangko Buat pengenceran larutan kalsium klorida
10% (1 dalam 50).
Larutan uji Masukkan krus berisi Baku, Zat uji dan
blangko ke dalam tanur, pijarkan pada suhu 550° selama
- 329 -
8 jam untuk pengabuan. Tambahkan 1,0 ml asam klorida
pekat P dan 1,0 ml asam nitrat pekat P ke dalam masing-
masing krus yang telah didinginkan. Panaskan masing-
masing krus di atas lempeng pemanas untuk melarutkan
residu. Pindahkan isi masing-masing krus secara
kuantitatif tanpa disaring ke dalam labu tentukur 100-ml,
dan encerkan dengan air sampai tanda. Pipet masing-
masing 1 ml larutan ini masukkan ke dalam labu
tentukur 100-ml. Tambahkan 2,0 ml larutan cesium
klorida 10% ke dalam masing–masing labu tentukur, dan
encerkan dengan air sampai tanda.
procedure Ukur serapan Larutan uji dan Blangko pada
panjang gelombang emisi 766,5 nm memakai
spektrofotometer serapan atom yang dilengkapi dengan
nyala api udara-asetilen P seperti tertera pada
Spektrofotometri dan hamburan cahaya <1191>. Buat
kurva serapan Larutan uji terhadap kadar kalium. Hitung
persentase bobot kalium dalam tiap tablet.
Senyawa sejenis Senyawa sejenis A diklofenak tidak
lebih dari 0,1%; masing-masing cemaran tidak lebih dari
0,1% dan jumlah semua cemaran tidak lebih dari 0,3%.
Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair
kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Dapar fosfat pH 2,5, Pengencer, tahap gerak, Larutan
uji, Larutan resolusi, Sistem kromatografi Lakukan
seperti tertera pada Penetapan Kadar.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Senyawa
Sejenis A Diklofenak BPFI, larutkan dan encerkan secara
kuantitatif dan jika perlu bertahap dengan Pengencer
sampai kadar lebih kurang 50 g per ml.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 30 l) Larutan uji dan Larutan baku
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak. Hitung persentase senyawa sejenis A
diklofenak dalam tablet dengan rumus:
S
U
r
r
A
C10
C yaitu kadar Senyawa Sejenis A Diklofenak BPFI
dalam g per ml Larutan baku; A yaitu jumlah dalam
mg diklofenak kalium dalam tablet yang dipakai ;
rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak senyawa
sejenis A diklofenak yang diperoleh dari Larutan uji dan
Larutan baku. Hitung persentase cemaran lain selain
dietil ftalat dalam tablet dengan rumus:
S
i
r
r
A
C10
ri yaitu respons puncak cemaran lain yang diperoleh
dari Larutan uji.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
Pengencer Campuran air-metanol P (30:70).
Dapar fosfat pH 2,5 Buat campuran beberapa volume
sama asam fosfat 0,01 M dan natrium fosfat monobasa
0,01 M. Atur pH sampai 2,5±0,2 dengan penambahan
salah satu komponen yang sesuai.
tahap gerak Buat campuran metanol P-Dapar fosfat pH
2,5 (70:30), saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan
penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera
pada Kromatografi <931>.
Larutan baku Timbang saksama beberapa Diklofenak
Kalium BPFI, larutkan dan encerkan dengan Pengencer
secara kuantitatif dan jika perlu bertahap sampai kadar
lebih kurang 50 g per ml.
Larutan resolusi Timbang saksama beberapa dietil
ftalat, Diklofenak Kalium BPFI dan Senyawa Sejenis A
Diklofenak BPFI, masukkan ke dalam labu tentukur yang
sesuai, larutkan dan encerkan dengan Pengencer sampai
kadar dietil ftalat P, Diklofenak Kalium BPFI dan
Senyawa Sejenis A Diklofenak BPFI berturut-turut lebih
kurang 40 g per ml; 0,5 mg per ml dan 37,5 g per ml.
Larutan uji Timbang dan serbukkan tidak kurang dari
20 tablet. Timbang saksama beberapa serbuk tablet setara
dengan lebih kurang 50 mg Diklofenak Kalium dan
masukkan ke dalam labu tentukur 100-ml. Tambahkan
70 ml Pengencer, aduk selama 60 menit dan encerkan
dengan Pengencer sampai tanda, dan sentrifus.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 254 nm dan kolom 25 cm x
4,6 mm berisi bahan pengisi L7 “end-capped”. Laju alir
lebih kurang 1 ml per menit. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan resolusi, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak seperti tertera pada procedure : resolusi, R,
antara puncak dietil ftalat dan senyawa sejenis A
diklofenak tidak kurang dari 2,5 dan resolusi, R, antara
puncak senyawa sejenis A diklofenak dan Diklofenak
Kalium tidak kurang dari 3,5. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan baku, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak seperti tertera pada procedure : simpangan
baku relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 10 l) Larutan uji dan Larutan baku
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram, dan ukur
respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg,
diklofenak kalium, C14H10Cl2KNO2 dalam serbuk tablet
yang dipakai dengan rumus:
S
U
r
rVC
20
C yaitu kadar Diklofenak Kalium BPFI dalam g per ml
Larutan baku; V yaitu volume labu tentukur yang
dipakai untuk pembuatan Larutan uji; rU dan rS
berturut-turut yaitu respons puncak Larutan uji dan
Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tidak tembus
cahaya, pada suhu ruang terkendali.
- 330 -
DIKLOFENAK NATRIUM
Diclofenac Sodium
Cl
H
N
ONaCl
O
Natrium[o-(2,6-dikloroanilino)fenil]asetat [15307-79-6]
C14H10Cl2NNaO2 BM 318,13
Diklofenak Natrium mengandung tidak kurang dari
99,0% dan tidak lebih dari 101,0% C14H10Cl2NNaO2,
dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan.
Pemerian Serbuk hablur; putih sampai hampir putih;
higroskopik. Melebur pada suhu 284°.
Kelarutan Mudah larut dalam metanol; larut dalam
etanol; agak sukar larut dalam air; praktis tidak larut
dalam kloroform dan dalam eter.
Baku pembanding Diklofenak Natrium BPFI; lakukan
pengeringan pada suhu 105° selama 3 jam sebelum
dipakai . Simpan dalam wadah tertutup rapat dan
terlindung dari cahaya. Senyawa sejenis A Diklofenak
BPFI; [N-(2,6-diklorofenil) indolin-2-on] (C14H9Cl2NO4
BM 278,14), tidak boleh dikeringkan. Simpan dalam
wadah tertutup rapat dan terlindung cahaya.
Identifikasi
A. Spektrum serapan inframerah zat yang telah
dikeringkan dan didispersikan dalam kalium bromida P
menampilkan maksimum hanya pada bilangan
gelombang yang sama seperti pada Diklofenak Natrium
BPFI.
B. Waktu retensi puncak diklofenak pada Larutan uji
sesuai dengan Larutan resolusi yang diperoleh pada
Kemurnian kromatografi.
C. Residu yang diperoleh dari pemijaran menampilkan
reaksi nyala Natrium seperti tertera pada Uji Identifikasi
Umum <291>.
Warna larutan Larutan 1 bagian dalam 20 ml metanol
tidak berwarna sampai kuning pucat. Serapan larutan pada
bilangan gelombang 440 nm tidak lebih dari 0,050.
pakailah metanol sebagai blangko.
Kejernihan larutan Larutan yang dibuat seperti tertera
pada Warna larutan tidak berbeda nyata kejernihannya
bila dibandingkan dengan beberapa metanol yang
diperlakukan sama.
pH <1071> Antara 7,0 dan 8,5; lakukan penetapan
memakai larutan (1 dalam 100).
Susut pengeringan <1121> Tidak lebih dari 0,5%;
lakukan pengeringan pada suhu 105° - 110° selama
3 jam.
Logam berat <371> Metode III Tidak lebih dari 10 bpj;
buat Larutan uji memakai gelas piala borosilikat 100
ml atau krus kuarsa. Jika sesudah pemijaran pada suhu
500° - 600° residu tidak putih sempurna, tambahkan
hidrogen peroksida P secukupnya untuk melarutkan,
panaskan perlahan sampai kering dan pijarkan selama 1
jam. Ulangi perlakuan dengan hidrogen peroksida P dan
pijarkan sampai residu putih sempurna. Lakukan seperti
tertera pada Larutan uji dimulai dari “Dinginkan,
tambahkan 4 ml asam klorida 6 N”.
Kemurnian kromatografi Masing-masing cemaran tidak
lebih dari 0,2% dan jumlah semua cemaran tidak lebih
dari 0,5%. Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi
cair kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi
<931>.
Dapar fosfat pH 2,5 Campur beberapa volume sama
asam fosfat 0,01 M dan natrium fosfat monobasa 0,01 M.
Jika perlu atur sampai pH 2,5±0,2 dengan penambahan
komponen yang sesuai.
tahap gerak Buat campuran metanol P-Dapar fosfat pH
2,5 (70:30), saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan
penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera
pada Kromatografi <931>. [Catatan Menaikkan jumlah
dapar akan meningkatkan resolusi].
Pengencer Campuran metanol P-air (70:30).
Larutan resolusi Buat larutan dalam Pengencer yang
mengandung 20 g dietil ftalat P, 7,5 g Senyawa Sejenis A
Diklofenak BPFI dan 0,75 mg Diklofenak Natrium BPFI
per ml.
Larutan baku Buat larutan Senyawa Sejenis A
Diklofenak BPFI dalam metanol P dengan kadar lebih
kurang 0,75 mg per ml. Ukur saksama beberapa volume
larutan, encerkan secara kuantitatif dengan Pengencer
sampai diperoleh larutan dengan kadar 1,5 g per ml.
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 75 mg
diklofenak natrium, masukkan ke dalam labu tentukur
100-ml, larutkan dan encerkan dengan Pengencer sampai
tanda.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 254 nm dan kolom 25 cm x
4,6 mm, berisi bahan pengisi L7 ”end-capped”. Laju alir
lebih kurang 1 ml per menit. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan resolusi, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak seperti tertera pada procedure : waktu
retensi relatif dietil ftalat, senyawa sejenis A diklofenak
dan diklofenak natrium masing-masing yaitu lebih
kurang 0,5, 0,6 dan 1,0; resolusi, R, antara puncak dietil
ftalat dan senyawa sejenis A diklofenak tidak kurang dari
2,2 dan antara puncak senyawa sejenis A diklofenak dan
diklofenak natrium tidak kurang dari 6,5; Lakukan
kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram
dan ukur respons puncak seperti tertera pada procedure :
- 331 -
simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang tidak
lebih dari 5%.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 10 l) Larutan baku dan Larutan uji
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama sesudah periode 2,5 kali waktu
retensi diklofenak natrium. Hitung persentase senyawa
sejenis A diklofenak dalam zat uji dengan rumus:
S
U
r
r
W
C10
C yaitu kadar Senyawa Sejenis A Diklofenak BPFI
dalam g per ml Larutan baku; W yaitu bobot dalam
mg, diklofenak natrium dalam Larutan uji yang
dipakai ; rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak
senyawa sejenis A diklofenak dalam Larutan uji dan
Larutan baku. Hitung persentase masing-masing cemaran
lain dalam zat dengan rumus:
S
i
r
r
W
C10
ri yaitu respons puncak masing-masing cemaran lain
dalam Larutan uji.
Penetapan kadar Timbang saksama lebih kurang 450 mg
zat, larutkan dalam 25 ml asam asetat glasial P, titrasi
dengan asam perklorat 0,1 N LV, tetapkan titik akhir secara
potensiometri. Lakukan penetapan blangko.
Tiap ml asam perklorat 0,1 N
setara dengan 31,81 mg C14H10Cl2NNaO2
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat
dan tidak tembus cahaya.
TABLET LEPAS TUNDA DIKLOFENAK
NATRIUM
Diclofenac Sodium Delayed-Release Tablet
Tablet Lepas Tunda Diklofenak Natrium mengandung
Diklofenak Natrium, C14H10Cl2NNaO2, tidak kurang dari
90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang
tertera pada etiket.
Baku pembanding Diklofenak Natrium BPFI; lakukan
pengeringan pada suhu 105° selama 3 jam. Simpan dalam
wadah tertutup rapat dan terlindung dari cahaya. Senyawa
Sejenis A Diklofenak BPFI; [N-(2,6-diklorofenil)indolin-
2-on] (C14H9Cl2NO4 BM 278,14), tidak boleh
dikeringkan. Simpan dalam wadah tertutup rapat dan
terlindung cahaya.
Identifikasi
A. Waktu retensi puncak diklofenak natrium pada
Larutan uji sesuai dengan Larutan baku yang diperoleh
pada Penetapan kadar.
B. Residu yang diperoleh dari pemijaran menampilkan
reaksi nyala Natrium seperti tertera pada Uji Identifikasi
Umum <291>.
Pelepasan obat <961>Metode B
TAHAP ASAM
Media disolusi: 900 ml asam klorida 0,1 N.
Alat tipe 2 (dayung terbuat dari atau dilapisi politef):
50 rpm.
Larutan baku Timbang saksama lebih kurang 68 mg
Diklofenak Natrium BPFI, masukkan ke dalam labu
tentukur 100-ml, tambahkan 10,0 ml natrium hidroksida
0,1 N, encerkan dengan air sampai tanda. Pipet 2 ml larutan
ini ke dalam labu tentukur 100-ml kedua, encerkan dengan
campuran asam hidroklorida 0,1 N-natrium hidroklorida
5 N (900:20) sampai tanda. Larutan baku ini mengandung
Diklofenak Natrium BPFI lebih kurang 13,6 g per ml.
procedure sesudah 2 jam, angkat tiap tablet (atau bagian
terbesar tablet jika tablet tidak utuh lagi) dari masing-
masing wadahnya. Terhadap tablet ini lakukan uji
seperti tertera pada tahap dapar. Tambahkan 20,0 ml
natrium hidroksida 5 N pada asam klorida 0,1 N yang
tersisa dalam tiap wadah, aduk selama 5 menit. Tentukan
jumlah C14H10Cl2NNaO2, yang terlarut dengan mengukur
serapan alikuot dan serapan Larutan baku pada panjang
gelombang serapan maksimum lebih kurang 276 nm.
TAHAP DAPAR
Dapar fosfat pH 6,8 Larutkan 76 g natrium fosfat
tribasa P dalam air sampai diperoleh larutan 1000 ml.
Campur 250 ml larutan ini dengan 750 ml asam klorida 0,1
N, jika perlu atur sampai pH 6,8±0,05 dengan penambahan
asam klorida 2 N atau natrium hidroksida 2 N.
Media disolusi: 900 ml Dapar fosfat pH 6,8.
Alat tipe 2: 50 rpm.
Larutan baku Timbang saksama lebih kurang 68 mg
Diklofenak Natrium BPFI, masukkan ke dalam labu
tentukur 100-ml, tambahkan 10,0 ml natrium hidroksida
0,1 N, encerkan dengan air sampai tanda. Masukkan 2,0 ml
larutan ini kedalam labu tentukur 100-ml kedua, encerkan
dengan Media disolusi sampai tanda. Larutan baku ini
mengandung Diklofenak Natrium BPFI lebih kurang
0,02 mg per ml.
procedure sesudah 45 menit, lakukan penetapan jumlah
C14H10Cl2NNaO2, yang terlarut dengan mengukur serapan
alikuot, jika perlu encerkan dengan Media disolusi, dan
bandingkan dengan serapan Larutan baku pada panjang
gelombang serapan maksimum lebih kurang 276 nm.
Toleransi Harus larut tidak kurang dari 75% (Q)
C14H10Cl2NNaO2, dari jumlah yang tertera pada etiket.
Keseragaman sediaan <911> Memenuhi syarat.
- 332 -
Kemurnian kromatografi Senyawa sejenis A diklofenak
tidak lebih dari 0,5%, masing-masing cemaran tidak lebih
dari 1,0% dan jumlah semua cemaran tidak lebih dari
1,5%. Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair
kinerja tinggi seperti tertera pada Kromatografi <931>.
Dapar fosfat pH 2,5, tahap gerak, Pengencer, Larutan
resolusi dan Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera
pada Penetapan kadar.
Larutan baku Buat larutan Senyawa Sejenis A
Diklofenak BPFI dalam metanol P dengan kadar lebih
kurang 0,8 mg per ml. Pipet beberapa volume larutan ini,
encerkan dengan Pengencer sampai diperoleh larutan
dengan kadar lebih kurang 4 g per ml.
Larutan uji pakailah Larutan uji pada Penetapan
kadar.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 10 l) Larutan baku dan Larutan uji ke
dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur respons
puncak utama sesudah 40 menit. Hitung persentase
senyawa sejenis A diklofenak dalam tablet dengan rumus:
S
U
r
r
A
C10
C yaitu kadar Senyawa Sejenis A Diklofenak BPFI
dalam g per ml Larutan baku; A yaitu bobot dalam mg
diklofenak natrium dalam tablet yang dipakai untuk
pengujian seperti tertera pada Penetapan kadar; rU dan rS
berturut-turut yaitu respons puncak senyawa sejenis A
diklofenak dalam Larutan uji dan Larutan baku. Hitung
persentase masing-masing cemaran lain selain dietil
ftalat dalam tablet dengan rumus:
S
i
r
r
A
C10
ri yaitu respons puncak masing-masing cemaran dalam
Larutan uji.
Penetapan kadar Lakukan penetapan dengan cara
Kromatografi cair kinerja tinggi seperti tertera pada
Kromatografi <931>.
Dapar fosfat pH 2,5 Campur beberapa volume sama
asam fosfat 0,01 M dan natrium fosfat monobasa 0,01 M.
Atur pH sampai 2,5 ± 0,2 dengan penambahan salah satu
komponen yang sesuai.
tahap gerak Buat campuran metanol P-Dapar fosfat pH
2,5 (70:30), saring dan awaudarakan. Jika perlu lakukan
penyesuaian menurut Kesesuaian sistem seperti tertera
pada Kromatografi <931>. [Catatan Menaikkan jumlah
dapar akan meningkatkan resolusi].
Pengencer Campuran metanol P-air (70:30).
Larutan baku Buat larutan Diklofenak Natrium BPFI
dalam Pengencer dengan kadar lebih kurang
0,75 mg per ml.
Larutan resolusi Buat larutan dalam Pengencer yang
mengandung 20 g dietil ftalat P, 7,5 g Senyawa Sejenis
A Diklofenak BPFI dan 0,75 mg Diklofenak Natrium
BPFI per ml.
Larutan uji Masukkan 20 tablet ke dalam labu tentukur
dengan kapasitas yang bila diisi sampai tanda dapat
diperoleh larutan dengan kadar diklofenak natrium
0,75 mg per ml. Tambahkan Pengencer sampai lebih
kurang 70% kapasitas labu, kocok secara mekanik tidak
kurang dari 30 menit untuk menghancurkan tablet.
Dinginkan sampai suhu ruang, encerkan dengan Pengencer
sampai tanda. Saring melalui penyaring dengan porositas
0,5 m. pakailah filtrat sebagai Larutan uji.
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada
Kromatografi <931>. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 254 nm dan kolom 25 cm x
4,6 mm berisi bahan pengisi L7 ”end-capped”. Laju alir
lebih kurang 1,0 ml per menit. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan resolusi, ukur respons puncak seperti
tertera pada procedure : waktu retensi relatif dietil ftalat,
senyawa sejenis A diklofenak dan diklofenak natrium
masing-masing lebih kurang 0,5, 0,6 dan 1,0; resolusi, R,
antara puncak dietil ftalat dan senyawa sejenis A
diklofenak tidak kurang dari 2,2 dan antara puncak
senyawa sejenis A diklofenak dan diklofenak natrium
tidak kurang dari 6,5. Lakukan kromatografi terhadap
Larutan baku, rekam kromatogram dan ukur respons
puncak seperti tertera pada procedure : simpangan baku
relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%.
procedure Suntikkan secara terpisah beberapa volume
sama (lebih kurang 10 l) Larutan baku dan Larutan uji
ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg,
diklofenak natrium, C14H10Cl2NNaO2, dalam tablet yang
dipakai dengan rumus:
S
U
r
r
20
VC
C yaitu kadar Diklofenak Natrium BPFI dalam mg per
ml Larutan baku; V yaitu volume dalam ml, labu yang
dipakai ; rU dan rS berturut-turut yaitu respons puncak
Larutan uji dan Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan Dalam wadah tertutup rapat,
tidak tembus cahaya.
DIKLOKSASILIN NATRIUM
Dicloxacillin Sodium
N
O
CONH
N
S
OCl
Cl CH3
CH3
CH3
H H
COONa
H
. H2O
Natrium (2S,5R,6R)-6-[3-(2,6-diklorofenil)-5-metil-
4-isoksasolkarboksamido]-3,3-dimetil-7-okso-4-tia-
1-azabisiklo[3,2,0]heptan-2-karboksilat monohidrat
[13412-64-1]
C19H16Cl2N3NaO5S.H2O BM 510,32
Anhidrat [343-55-5] BM 492,32
- 333 -
Dikloksasilin Natrium mengandung setara dengan tidak
kurang dari 850 μg dikloksasilin, C19H17Cl2N3O5S
per mg.
Pemerian Serbuk hablur; putih atau hampir putih.
Kelarutan Mudah larut dalam air.
Baku pembanding Dikloksasilin Natrium
.jpg)
